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一种基于固相法血型鉴定的验血板及其使用方法的开发研究

[日期:2018-01-03]   来源:河北省临床医学工程学会  阅读: 0[收藏本站]
一种基于固相法血型鉴定的验血板及其使用方法的开发研究
白求恩国际和平医院医学工程科  陈晓飞   王延辉
 
摘要目前临床常用的血型鉴定方法有试管凝集法和微柱凝胶法,所需的检测试剂要求低温冰箱保存,实验操作需要离心机,都需要电力供应,而后者鉴定时间较长,还需要专用的仪器和试剂,且价格较高,两者均不适合突发事件情况下野外使用。本文阐述了一种适于在抗震救灾和战争处突条件下快速鉴定血型的基于固相法血型鉴定的验血板的研制过程。
Abstract: The current clinical methods of identification of blood type include test tube agglutination method and microcolumn gel method,and the required test reagent must be kept by the cryogenic refrigerator, and the experimental operation needs the centrifuge and the power supply. The microcolumn gel method to identify the blood type needs a long time and it must be used for special equipment and reagents, and it is expensive. The above two methods are not suitable for emergencies. The paper describes the development of a rapid identification of blood type of blood type based on solid phase under the condition of earthquake relief and war emergency.
关键词:血型鉴定;固相法;验血板
研究意义及背景技术
抢险救灾和现代战争环境中存在各种突发性、不确定性和惨烈性, 致使急需输血进行救治的危重伤员的数量急剧增加。同时,为了保证各种血液制品输注有效和紧急情况下的用血安全, 必须严格遵守输血前血型鉴定、交叉配血等各种检测的标准操作规程要求,这在野战条件下或突发事件时是很难保障的,如果血型鉴定和交叉配血不准确就可能导致伤员误输异型血而发生严重输血反应,甚至会危机生命。本研究采用特异性单克隆抗-A、抗-B、抗-D抗体做为ABO血型正定型试剂,采用标记特异性红细胞膜ABO血型抗原(金标抗原)做为反定型免疫胶体金试剂,正反定型试剂均设置在板体上,操作简单快捷,携带方便,准确性高,适合流动采血点和应急输血时的血型定型试剂同时正反定型试剂放置在微球内,当使用时只需将微球挤破即可,试剂在微球内能够常温、长期保存,解决在野外条件下断水、断电、设备试剂无法及时供应的情况下如何有效地为失血伤员输血的实际问题,意义重大。
设计方法
一种基于固相法血型鉴定的验血板,其包括板体、设置在板体中部的样本槽、设置在样本槽一侧的抗体槽以及设置在样本槽另一侧的金标槽,在抗体槽内有单抗,在金标槽内设置有金标红细胞膜抗原,在所述样本槽与抗体槽之间设置有吸水纸,在样本槽与金标槽之间设置有滤血膜。
本研究将高效价的特异性单克隆抗体包裹到微球中,确保ABO正定型试验结果的特异性和稳定性良好,反定型采用免疫胶体金试剂将胶体金粒子标记到提取的具有完整血型抗原的红细胞膜上,解决了常规反定型标准红细胞易溶血、保存期短的问题,并利于血型正反定型同步进行,实现标准化操作,将正反定型试剂预包被在微球中,实际应用时只需在加样槽内加入被检者的全血,通过快速吸附和滤血膜的作用,红细胞进入正定型侧与单抗血清反应,经过滤血膜滤去红细胞的血浆进入反定型侧与金标膜抗原反应,根据凝集结果判定血型。
附图说明
 
 
1  本研究结构示意图
 
 
2  本研究剖视图
实施方式
如附图12所示,本研究的验血板包括板体1、位于板体1中部的样本槽5、设置在样本槽5一侧的抗体槽2以及设置在样本槽5另一侧的金标槽3,在抗体槽2内有单抗,在金标槽3内设置有金标红细胞膜抗原,在所述样本槽5与抗体槽2之间设置有吸水纸7,在样本槽5与金标槽3之间设置有滤血膜8。在本实施例中,抗体槽2位于样本槽5的左侧,样本槽5内的血样在吸水纸7的作用下,全血向抗体槽2内移动,全血内的红细胞与单抗反应进行正定型。金标槽3位于样本槽5的右侧,样本槽5内的全血经过滤血膜的过滤,血浆向金标槽3移动,血浆与金标红细胞膜抗原反应进行反定型。
所述单抗为抗-A、抗-B、抗-D,所述抗体槽2为三个,在三个抗体槽2内分别设置有抗-A、抗-B、抗-D,三个所述抗体槽2分别通过吸水纸7与样本槽5连通。所述金标红细胞膜抗原为金标AAg、金标BAg、金标CAg,所述金标槽3为三个,在三个金标槽3内分别设置有金标AAg、金标BAg、金标CAg,三个所述金标槽3分别用过滤血膜8与样本槽5相连通。
在所述抗体槽2与金标槽3内均设置有微球4,所述单抗与金标红细胞膜抗原均设置在微球4内。
所述吸水纸7一端设置在抗体槽2内,另一端设置在样本槽2内部或越过样本槽5,所述滤血膜8一端设置在金标槽3内,另一端设置在样本槽2内部或越过样本槽5
当吸水纸7或滤血膜8中的一个越过样本槽5时,吸水纸7与滤血膜重叠的部分,吸水纸7设置于滤血膜8上方。
在样本槽5与抗体槽2和金标槽3之间可以设置凹槽6,吸水纸7与滤血膜8均设置在凹槽6
上述验血板的使用方法包括如下步骤:
步骤一:将抗体槽2与金标槽3内的微球4挤破,使微球4内的试剂流出;
步骤二:在样本槽5内加入全血样本,在吸水纸7的作用下全血向抗体槽2移动,红细胞与单抗反应,进行正定型;在滤血膜8的作用下滤除红细胞后的血浆向金标槽3移动,血浆与金标红细胞膜抗原反应,进行反定型;
步骤三:观察步骤二中的反映结果,根据正反定型凝集结果判定血型。
总结
本研究具有以下优点: 试剂保存方便,传统的试剂需要2-8℃保存,该试剂可常温保存。便于携带,污染小,克服了液相试剂容易泼溅的缺点,操作现场能够保持清洁。操作简单快捷,无需借助仪器,实验不需要动力及设备保障,结果直观,易于判读,非专业人员就可实施,2min之内即可判读结果。稳定性好,效期长。固相载体上易于粘贴条形码,可以避免出错。检测卡可拆分,易于携带和保存,随取随用,方便使用。因此,在缺水断电的野外应急血液保障时运用此方法可大大提高血型鉴定准确性。
 
 
 
 
 
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